娄瑞娟;罗利龙;张霞;张瑞刚;宋水山;

• 1:河北工业大学化工学院
• 2:河北省生物研究所
• 3:石家庄市第二中学

摘要(Abstract)：

巴斯德毕赤酵母经过近二十来年的发展,已经成为表达外源基因的优秀表达系统之一,成功地表达了许多重组异源蛋白。从表达菌株,表达载体等方面详细综述了毕赤酵母表达系统的优点,如:营养要求低、可高密度发酵、遗传稳定性高等;分析了可能影响巴斯德毕赤酵母表达系统的相关因素,这些因素包括外源基因的特性、基因拷贝数、产物稳定性及发酵策略等,结合这些因素和具体实践经验,就如何提高外源基因在巴斯德毕赤酵母中表达量进行了阐述;讨论了该表达系统存在的不足之处并且展望了其发展前景。

关键词(KeyWords)： 巴斯德毕赤酵母;表达系统;外源基因;高效表达

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金资助(项目编号:30970030);; 河北省自然科学基金资助(项目编号:C2006000707)

作者(Author): 娄瑞娟;罗利龙;张霞;张瑞刚;宋水山;

Email:

DOI:

参考文献(References)：

• [1]Lin-cereghino J,Hashimoto M D,Moy A,et al.Direct selection ofPichia pastorisexpression strains using new G418 resistance vectors[J].Yeast,2008,25(4):293-299.
• [2]Mochizuki S,Hamato N,Hirose M,et al.Expression and character-isation of recombinant human antithrombin III inPichia pastoris[J].Protein Expr Purif,2001,23(1):55-65.
• [3]Menendez J,Hernandez L,Banguela A,et al.Functional productionand secretion of theGluconoacetobacter diazatrophicusfructose-relea-sing exo-levanase(LsdB)inPichia.pastoris[J].Enz Microb Techn-ol,2004,34(5):446-452.
• [4]吕中原,钱江潮,储炬,等.同时利用AOX1和GAP启动子表达SAM合成酶促进重组毕赤酵母中S-腺苷甲硫氨酸积累[J].工业微生物,2008,38(4):24-30.
• [5]Menendez J,Valdes I,Cabrera N.TheICL1 gene ofPichia pastoris,transcriptional regulation and use of its promoter[J].Yeast,2003,20(13):1097-1108.
• [6]姚清侠,黄勤锋,曹毅,等.猪γ-干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒作用[J].中国兽医学报,2008,28(4):451-455.
• [7]赵翔,霍克克,李育阳,等.毕赤酵母的密码子用法分析[J].生物工程学报,2000,16(3):308-312.
• [8]吴丽娟,蒋建新,朱佩芳,等.巴斯德毕赤酵母基因组外源基因整合数的高通量定量分析[J].第三军医大学学报,2006,28(7):640-643.
• [9]Zhou X S,Zhang Y X.Decrease of proteolytic degradation of recom-binant hirudin produced byPichia pastorisby controlling the specificgrowth rate[J].Biotechnol Lett,2002,24(17):1449-1453.
• [10]姚钰舜,储炬,杭海峰,等.培养条件对重组毕赤酵母高密度表达猪胰岛素前体的影响[J].华东理工大学学报,2006,32(4):397-340.
• [11]Xue Q,Ding Y X,Shang C H,et al.Functional expression of LZ-8,a fungal immunomodulatory protein fromGanoderma IucidiuminPichia pastoris[J].Appl Microbiol,2008,54(6):393-398.
• [12]Zhao HL,Xue C,Wang Y,et al.Increaing the cell viability andheterologous protein expression ofPichia pastorismutant deficient inPMR1 gene by culture condition optimization[J].Appl MicrobiolBiotechnol,2008,81(2):235-241.
• [13]诸葛斌,堵国成,诸葛健,等.碱性果胶酯裂解酶基因工程菌Pichia pastoris诱导表达条件初步优化[J].应用与环境生物学报,2008,14(4):539-543.
• [14]Macauley-Patrick S,Fazenda M L,McNeil B,et al.Heterologousprotein production using thePichia pastorisexpression system[J].Yeast,2005,22(4):249-270.
• [15]郭小泽.毕赤酵母表达系统及其在水产领域的应用[J].内陆水产,2008,33(2):6-8.
• [16]许英蕾,孙建义,刘明启.巴斯德毕赤酵母表达系统及其在饲料添加剂开发前景的应用[J].生物技术,2005,26(2):40-42.
• [17]孙静,孙惠玲,张培君.巴斯德毕赤酵母表达系统在动物传染病防制中应用的研究进展[J].中国兽医科学,2008,38(5):451-455.
• [18]张倩,宋海峰.毕赤酵母N-糖基化改造的研究进展[J].中国新药杂志,2008,17(14):1206-1208.
• [19]王越,巩新,唱韶红,等.α-1,6-甘露糖转移酶基因敲除的毕赤酵母菌株构建及其用于融合蛋白HSA/GM-CSF表达的研究[J].生物工程学报,2007,23(5):907-914.