生物学杂志

2020, v.37;No.217(05) 108-111

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猪小肠黏膜下层脱细胞基质中Ⅰ、Ⅲ型胶原检测方法研究
Study on the detection method of type Ⅰ/Ⅲ collagen in porcine small intestinal submucosa extracellular matrix

张扬;陈毅;高建萍;夏磊磊;李勇超;王清石;张贵锋;赵博;

摘要(Abstract):

猪小肠黏膜下层脱细胞基质(SⅠS,Small intestinal submucosa)的主要成分为Ⅰ、Ⅲ型胶原,拟建立一种基于液相质谱联用(HPLC-MS)的胶原类型识别和定量检测方法。首先利用胰蛋白酶将胶原标准品和样品酶解,利用离子阱质谱(Ⅰon trap mass spectrometry, LCQ)识别出Ⅰ、Ⅲ型胶原的特征多肽分别为GETGPAGPAGPVGPVGAR、GPPGAVGPSGPR,再利用三重四极杆质谱(Triple quadrupole mass spectrometry, TSQ)对其进行定量;然后通过胶原标准品浓度和峰面积的线性关系计算Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量。结果表明VⅠDASⅠS~(TM)和Biodesign~?中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量总和与高效液相色谱法检测结果一致,通过HPLC-MS检测猪跟腱和真皮中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量的结果符合其在组织中的分布规律;方法学实验表明HPLC-MS的精密度(RSD=2.38%)较高、稳定性良好。

关键词(KeyWords): 猪小肠黏膜下层;脱细胞基质;Ⅰ型胶原;Ⅲ型胶原;液质联用

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 中关村科技园区管理委员会“重大前沿原创技术成果转化和产业化”;; 北京市科技新星计划(XX2018008);; 国家重点研发计划(2018YFA0108200);国家重点研发计划(2018YFC1106400);; 广东省自然科学基金项目(2014A030312013);; 海口市海洋经济创新发展示范城市产业链协调创新类项目(HHCL201804)

作者(Author): 张扬;陈毅;高建萍;夏磊磊;李勇超;王清石;张贵锋;赵博;

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